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Alla fine della stanza dei cinquecento è presente una piccola stanza, anche questa opera del Vasari, ma senza finestre. Le pareti e le volte sono tutte dipinte con le rappresentazioni dei quattro elementi: acqua, fuoco, terra e aria, mentre il ritratto di Cosimo I e di sua moglie fu realizzato dal Bronzino. Sul soffitto è rappresentato il mito di Prometeo, mentre nelle nicchie alle pareti sono presenti delle piccole sculture opere del Giambologna e del Ammannati. La stanza rappresenta l'interesse che Francesco de medici aveva per lo studio delle Scienze naturali, l'alchimia e l'arte. Questa stanza realizzata senza alcune fonte di luce, era stracolma di armadi, nei quali erano custoditi oggetti e preziosi di ogni tipo.